Prueba de reacciones febriles

Objetivo: Busqueda de anticuerpos contra Salmonella, Brucellas y Rikettsias con apoyo en el diagnostico de fiebre Tifoidea, Brucelosis, y Riketsiosis. Material: 1. Todo lo necesario para sacar sangre a. jeringa b. algodon c. alcohol d. torniquete 2. tubo sin anticoagulante 3. placa de 36 orificios 4. Aplicadores de madera 5. pipeta Pasteur Muestra biologica: 1. suero sanguineo Reactivos: 1. Anfigenos febriles 2. Tifico “O” 3. Tifico”H” 4. Paratifico”A” 5. Paratifico”B” 6. Brucela 7. Proteus ox-19 8. Tecnica o Procedimiento: 1. extraer 1 ml. de suero. 2. olocar una gota de suero a 6 orificios de la placa con suero sanguineo. 3. Agregar una gota de Tifico”O” a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 4. Agregar una gota de Tifico”H” a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 5. Agregar una gota de Paratifico”A” a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 6. Agregar una gota de Paratifico”B” a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 7. Agregar una gota de Brucella a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 8. Agregar una gota de Proteus ox-19 a un orificio de la placa con el suero sanguineo. 9. Mezclar con l aplicador de madera (uno para cada uno). 10. Agitar durante 5 minutos en el agitador de placas. 11. Observar al microscopio con el objetivo 10 o 20 x. 12. Interpretar resultados. a) Presencia de aglutinacion (la prueba es positiva) Se procedera a cuantificar los anticuerpos. b) Ausencia de aglutinacion (la prueba es negativa) 13. Agregar 20 microlitros de suero sanguineo a los orificios de la placa que hayan dado positivo. 14. Agregar una gota de reactivo al suero sanguineo que salio positivo. 15. mezclar con el aplicador de madera. 16. Agitar durante 5 minutos. 17. Observar al microscopio. 8. Interpretar resultados. Observaciones Para poder llevar acabo esta practica lo primero que tuvimos en cuenta era que se tenia que tener mucho cuidado con lo que estabamos haciendo asi que para empezar tuvimos que extraer un mililitro de suero sanguineo y empezamos por colocar con una pipeta una gotita de suero en 6 de los orificios de la placa de 36 orificios despues de esto teniamos que agregar una gota de reactivo a cada orificio pero teniamos tener cuidado los teniamos que poner en orden y no perder ese orden por que si salia positivo no sabriamos que reactivo le tocaria.

Lo que hicimos fue lo siguiente: 1 orificio : Tifico “O” 2 orificio : Tifico “H” 3 orificio : Paratifico “A” 4 orificio : Paratifico “B” 5 orificio : Brucilla 6 orificio : proteus ox-19 Los mezclamos con Aplicadores de madera lo siguiente era poner la placa en el agitador de placas por 5 minutos mas sin embargo como no habia agitador de placas la placa la agitamos con la mano por 5 minutos eso fue divertido.

Despues de eso observamos en el microscopio orificio por orificio para ver cuales eran negativas y cuales positivas. En mi equipo el orificio 1, 3, 5,6 salieron positivos por que aglutinaron y los otros dos no de ahi continuamos con la cuantificacion pusimos la mitad de la gota de suero de los que salieron positivos y le pusimos una gota de reactivo, las mezclamos con el aplicador de madera de nuevo y las agitamos por 5 minutos y observamos en el microscopio y asi sucesivamente las que salian positivas.

Conclusion: Dada por terminada esta practica doy por visto el como he aprendido a utilizar el microscopio y a enfocar bien a ser mas responsable y a tener mas cuidado la verdad esta practica fue sencilla pero un poco larga ya que utilizamos como 1:30 para llevarla acabo.

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