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PCR- ELISA Realizado por: Christhian Medina Moscoso PCR son las siglas por las que se conoce a la reacción en cadena de la polimerasa una técnica científica avanzada que fue inventada por el bioquímico estadounidense Kary Mullis en 1985 Esta técnica permite OF4 pequeñas regiones e ci Swip next pase en laboratorio PCR-ELISA ELISA son las siglas por las que se conoce al ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas Se trata de una técnica de laboratorio que fue diseñada por científicos suecos y holandeses en 1971 , que permite etectar pequeñas partículas llamadas antígenos, que habitualmente son fragmentos de proteínas sobre un soporte o pocillo (inmunoadsorbente) la reacción Ag-Ac quedará inmovilizada y, por tanto, será fácilmente revelada mediante la adición de un substrato especifico que al actuar, la enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un espectrofotómetro o un colorímetro. TIPOS: ELISA no competitivo: Consiste en enfrentar la muestra con el Ag o Ac que está en la fase sólida. Si una muestra es positiva se formará el complejo Ag-Ac, y al agregar el conjugado reaccionará con el respectivo sustrato desarrollando color. Directo: Detectan Ag Indirecto: Detectan Ac ELISA sandwich Doble (DAS) Heterólogo

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(HADAS) ELISA competitivo: El Ac de la muestra va a competir con el conjugado por un número limitado de sitios de unión del Ag. Habrá ausencia de color en una muestra positiva debido a que el sustrato no encontrará a la enzima porque el conjugado ha sido ELISA directo substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora. Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado. Los lectores ELISA se llaman espectrofómetr OS!! ELISA indirecto Consta de las siguientes etapas: 2. 3. Fijación al soporte insoluble («tapizado») de Ags específicos. Lavado con solución salina Tween 20 como agente tensioactivo (ph-7,2) para eliminar los Ags fijados deficientemente o no fijados.

Adición de Acs marcados rconjugados») con una enzima; si los Acs reaccionan con los Ags, el complejo quedará solubilizado. 5. 6. Adición de un substrato sobre el que sea capaz 3 Lectura visual o colorimétri to final coloreado. Enfermedades producidas por Micoplasmas Enfermedades producidas por bacterias Mycobacterium tuberculosis, brucelas, Estreptococos, Salmonelas… Enfermedades producidas por virus Toxoplasmosis, Triquinosis, Tripanosomas… Enfermedad de Newcastle, Peste porcina, Rotavirus, artritis vírica, Leucemia felina. Otras aplicaciones Hormonas (GCH, Progesterona, Testosterona.. ) Cuantificación de inmunoglobulinas (IgG, IgE, IgA) Inmunopatología (Ac anti-DNA, Factor reumatoide, Inmunocomplejos circulantes) Bibliografía: EL